松木包装板材的伞滑刃线虫种类

松材线虫(Bursaphelenchus)是松树的重要病原线虫,引起松树萎蔫病,给林业生产造成严
重损失[1].世界上许多国家将松材线虫及其媒介昆虫列为检疫性有害生物,如欧洲一地中海植物保护组织 将松材线虫列为A1类检疫性有害生物,我国将其列为二类进境检疫性有害生物[2].木质包装材料(尤其 是松木)是一类常规的包装材料,由于可能携带松材线虫而被各国要求检疫.我国于2000年开始对美国、 曰本输往中国货物的木质包装材料采取检疫监管措施,防止松材线虫传人[3].福建省每年从省外调人大批 货物,我国部分省份报道有松材线虫为害.为了探明省际货物包装板材传播松材线虫的可能性,作者对从 省外输人福建省的货物松木包装板材进行线虫种类调査.
1材料与方法
11标本采集
标本采自从上海、安徽、江苏、广东等省调人的电梯、发酵罐、人工气候箱、干燥箱、生化培养箱、生化试 剂、投影仪幕布等货物的松木包装板共8份,采集有蓝变和天牛蛀道的板材.
1.2线虫分离、培养和鉴定
1.2.1线虫的分离将板材劈成小条状,放人烧杯中加水淹没,然后置于恒温箱(25 X:)中孵育12_24 h. 浸泡液通过350目筛,收集线虫.用倒置显微镜检查线虫,确定为伞滑刃属线虫后挑取培养⑴.
1-2-2线虫的纯培养从包装板材中分离的线虫数量较少,且为持久幼虫(dauelarva).为了获得大量成虫 供鉴定用,需进行培养繁殖.将线虫挑人1 g • L-1硫酸链霉素消毒15 miii,用无菌水漂洗3次,接人PSA 平板或麦粒培养基三角烧瓶中长好的灰葡萄孢菌丝中培养[1].
1.2.3线虫的鉴定将培养的线虫收集于指形玻管中,于65 •(:恒温水浴2 — 3 miii,缓慢杀死线虫,加人等 体积的倍量TAF固定液固定24 h.以TAF为浮载剂将线虫制成临时玻片,于倒置显微镜下进行形态观 察和显微计测厂。
抽样结果
从8个松木包装箱的板 材样本中,发现来自上海的 电梯包装板和生化培养箱包 装板分别携带拟松材线虫和 松材线虫,表明省际流通的 松木包装材料能携带松材线 虫.
2.2线虫的培养
板材中分离获得的伞滑 刃线虫持久幼虫,在PSA培 养基上或麦粒培养基三角烧 瓶中的灰葡萄孢上培养,15 -20 d后平板上的菌丝被 取食消解(图1A),线虫大量 繁殖,其中有许多成虫.线虫 大量繁殖后沿培养皿或三角 瓶壁的水膜向上迁移,在培 养皿盖内和三角瓶内壁上聚集成线虫网。
形态特征:见图2.雌虫加热杀死后,呈宽“C”形;唇区高,缢缩;口针细长,口针基部球小;食道呈滑刃 型,中食道球大,几乎充满体宽,食道腺长叶形,覆盖于肠背面;排泄孔位于食道腺与肠连接的水平处.单卵 巢,前伸;阴门开口于虫体后部,约为体长的74.2%处;前阴唇向后延伸形成阴门盖.尾部近圆筒形,无尾尖 突.
雄虫加热杀死弯曲呈“J”形.尾部弓状,尾端尖细,侧面观呈爪状;尾末端有一卵圆形交合伞;尾部有7 个尾乳突,即1对肛乳突、1个肛前腹乳突、2对肛后乳突.交合刺弓形,啄突明显,末端膨大呈盔状(cucul- lus).
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