松木包装板材的伞滑刃线虫种类鉴定

 
 
 
摘要:记述了输入福建省的松木包装板材中分离到的松材线虫(B ursq) helenchu s xy hphilus)和拟松材线虫(B. m.ucronatuis),讨论了松材线虫对福建省林业构成的威胁.
 
关键词:松木包装板材;松材线虫;拟松材线虫
 
 
 
松材线虫(B ursq) heknchus xy loph ilus)是松树的重要病原线虫,引起松树萎蕩病,给林业生广造成严 重损失[1].世界上许多国家将松材线虫及其媒介昆虫列为检疫性有害生物,如欧辦—地中海植物保护组织 将松材线虫列为A 1类检疫性有害生物,我国将其列为二类进境检疫性有害生物[2].木质包装材料(尤其 是松木)是一类常规的包装材料,由于可能携带松材线虫而被各国要求检疫•我国于2000年开始对美国、
 
曰本输往中国货物的木质包装材料采取检疫监管措施,防止松材线虫传入[3].福建省每年从省外调入大批 货物,我国部分省份报道有松材线虫为害•为了探明省际货物包装板材传播松材线虫的可能性,作者对从 省外输入福建省的货物松木包装板材进行线虫种类调查•
 
1材料与方法
 
1 1标本米集
 
标本采自从上海安徽、江苏、广东等省调入的电梯发酵罐人工气候箱、干燥箱生化培养箱生化试 剂、投影仪幕布等货物的松木包装板共8份,采集有蓝变和天牛蛀道的板材.
 
1 2线虫分离、培养和鉴定
 
121线虫的分离将板材劈成小条状,放入烧杯中加水淹没,然后置于恒温箱(25°C )中孵育12- 24 h 浸泡液通过350目筛,收集线虫•用倒置显微镜检查线虫,确定为伞滑刃属线虫后挑取培养[1].
 
122线虫的纯培养从包装板材中分离的线虫数量较少,且为持久幼虫(dauelarva).为了获得大量成 虫供鉴定用,需进行培养繁殖.将线虫挑入1g° L-1硫酸链霉素消毒15m in,用无菌水漂洗3次,接入 PSA平板或麦粒培养基三角烧瓶中长好的灰葡萄孢(Botrytis cinerei)菌丝中培养[1].
 
123线虫的鉴定将培养的线虫收集于指形玻管中,于65 °0恒温水浴2-3mh缓慢杀死线虫,加入 等体积的倍量TAF固定液固定24h以TAF为浮载剂将线虫制成临时玻片,于倒置显微镜下进行形态 观察和显微计测[1].
 
2结果与分析
 
2 1抽样结果
 
从8个松木包装箱的板 材样本中,发现来自上海的 电梯包装板和生化培养箱包 装板分别携带拟松材线虫和 松材线虫,表明省际流通的 松木包装材料能携带松材线 虫.
 
2 2线虫的培养
 
板材中分离获得的伞滑 刃线虫持久幼虫,在PSA培 养基上或麦粒培养基三角烧 瓶中的灰葡萄孢上培养,15 -20 d后平板上的菌丝被
取食消解(图1A),线虫大量 繁殖,其中有许多成虫.线虫 大量繁殖后沿培养皿或三角 瓶壁的水膜向上迁移,在培 养皿盖内和三角瓶内壁上聚集成线虫网(图1B 1C).
 
2 3线虫的鉴定
 
2 3 1松材线虫 B ursaphelenchu s xy loph ibis (S teiner & Buh rer 1934) N ickle 1970 标本来源:上海生化培养箱松木包装箱板材中分离的线虫,通过灰葡萄孢培养.
 
测量值:见表1.
 
形态特征:见图2雌虫加热杀死后,呈宽“C”形;唇区高,缢缩;口针细长,口针基部球小;食道呈滑刃 型,中食道球大,几乎充满体宽,食道腺长叶形,覆盖于肠背面;排泄孔位于食道腺与肠连接的水平处.单卵 巢,前伸;阴门开口于虫体后部,约为体长的74 2%处;前阴唇向后延伸形成阴门盖.尾部近圆筒形,无尾尖 突.
 
雄虫加热杀死弯曲呈“ r形.尾部弓状,尾端尖细,侧面观呈爪状;尾末端有一卵圆形交合伞;尾部有7 个尾乳突,即1对肛乳突、1个肛前腹乳突、2对肛后乳突.交合刺弓形,琢突明显,末端膨大呈盔状(cucul-lus)-
 
形态特征与N ick le et al[4]对松材线虫(B. xy bp hilus)的描述相^■致,其测量值(表1)与南京[5]上 海[6]、美国[4]、日本[4等地的种群接近,确定为松材线虫.
 
表1松材线虫不同群体测量值比较
Table 1 M easu rem en ts on th e popu lat ion s ofB. xy bp h i h s
群体 n 体长tm a V 口针长户m 交合刺长Pm
雌虫 板材群体 30 886 0(670- 980) 36 4(344- 43 5) 10 0(87- 11.7) 26 4(20 0- 36 8) 74. 2( 67. 2- 85. 2) 15. 5( 12. 5- 20. 0) -
南京群体[51 20 11400(960- 131 0) 39.4( 32 0- 52 0) 11. 1(90- 12 0) 27.3(23 6- 31.6) 72. 9( 70. 0- 82. 0) 15. 2( 13. 5- 16. 2) -
上海群体『61 20 813 0(670- 960) 43, 0( 38 2- 47. 5) 99(9.3- 103) 27.2(24 8- 30 0) 75. 1( 68. 9- 78. 9) 15. 3( 13. 8- 18. 0) -
日本群体[41 40 8100(710- 1010) 40. 0( 33. 0- 46. 0) 10 3(94- 12 8) 26 0( 23 0- 32 0) 72. 7( 67. 0- 78. 0) 15. 9( 14. 0- 18. 0) -
美国群体[41 5 523 0(447- 609) 42. 6( 37. 0- 48. 0) 96(83- 105) 27.2(23 0- 31.0) 74. 7( 73. 0- 78. 0) 12. 8( 12. 6- 13. 0) -
雄虫 板材群体 30 774 0(670- 880) 36 2(30 7- 40 5) 91(7.8- 128) 26 4( 22 2- 32 8) - 15. 4( 11. 3- 18. 8) 27. 7( 22. 5- 32. 5)
南京群体 [51 20 1070 0(910- 119 0) 47. 6( 35. 0- 54. 9) 11.0(92- 15.0) 31. 3(28 5- 35 0) - 15. 1( 13. 5- 17. 6) 29. 8( 27. 0- 32. 0)
上海群体[61 20 712 5(570- 850) 40. 9( 37. 5- 44. 7) 9 9(8 5- 116) 27. 2( 22 2- 29. 6) - 15. 1( 13. 8- 16. 3) 26. 0( 23. 8- 28. 8)
日本群体[41 30 730 0(590- 820) 42. 3( 36. 0- 47. 0) 94(7.6- 113) 26 4(210- 31.0) - 14. 9( 14. 0- 17. 0) 27. 0( 25. 0- 30. 0)
美国群体[41 5 560 0(520- 601) 40. 8( 35. 0- 45. 0) 94(84- 105) 24.4(21 0- 29.0) - 13. 3( 12. 6- 13. 8) 21. 2( 18. 8- 23. 0)
 
A. PSA平板上的灰葡萄孢菌(左为无线虫的葡萄孢右为被线虫取食后的状态);B.在葡萄孢上 繁殖的松材线虫沿三角瓶壁的水滴向上迁移形成线虫网;G线虫网中的线虫虫体.
 
 
2 32 拟松材线虫 B. m ucrona tus M am iya& Enda 1979
 
标本来源:上海电梯松木包装箱板材中分离的线虫,通过灰葡萄孢培养.
 
形态特征:见图3形态特征与松材线虫近似,但雌虫具有明显的尾尖突,尾尖突长度除极少数较短 外,大部分为3 75- 7 50^m;雄虫具有离肛型铲状交合伞.
A.雌虫头部;B.雌虫阴门、阴门盖;C.雌虫尾部(钝圆);R雄虫尾 部;E.尾尖交合伞(椭圆形).
 
图2松材线虫的光学显微照片
A.雌虫头部;B.雌虫阴门、阴门盖;C.雌虫尾部(有长尾尖突); D-雄虫尾部;B尾尖交合伞(铲状).
 
图3拟松材线虫的光学显微照片
F ig 2 O pt ical m icro scop ic pho tog raphs o fB. xy loph i h s F ig 3 O pt ical m icro scop ic pho tog raphs of B. mucronatus
 
测量值:见表2
 
松材线虫和拟松材线虫的形态学极为相似,雌虫都具有阴门盖,雄虫交合刺末端均盔状膨大,松材线 虫雌虫有时也具短尾尖突.这2个种的主要区别:松材线虫雌虫尾部宽圆或有短尾尖突(< 2^m),雄虫尾 尖交合伞呈卵圆形;拟松材线虫雌虫有明显尾尖突、长度> 2^m,雄虫尾尖交合伞呈铲状平截.本试验的
 
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